Исследование мочи имеет большое диагностическое значение не только при заболеваниях почек, но и многих других органов и систем организма
Скачать 0.6 Mb.
|
3.6 Микроскопическое исследование мочи3.6.1. Требования к образцу осадка мочи для микроскопического исследования. Исследование проводят в первой утренней порции мочи, которая является наиболее концентрированной, что способствует увеличению количества элементов осадка, или в случайной (рандомизированной) порции. Перед проведением исследования врач должен иметь информацию о времени сбора мочи и результатах физико-химических исследований. Необходимо строго соблюдать условия хранения образца мочи. Исследование осадка необходимо выполнять в течение 4-х часов после сбора мочи, при более позднем исследовании образец мочи нужно хранить в холодильнике, не замораживая. Большинство консервантов влияют на результаты тестов диагностических полосок, поэтому их применение нежелательно, но при необходимости можно использовать тимол (несколько кристаллов на образец мочи). Применяются также вакуумные пробирки, содержащие стабилизатор для клеточных элементов, который не влияет на результаты диагностических полосок. 3.6.2. Виды микроскопических исследований. Микроскопическое исследование при общем анализе мочи проводится в нативном препарате на предметных стеклах в затемненном поле микроскопа или с опущенным конденсором. При наличии трудно дифференцируемых клеток могут применяться суправитальные окраски (краска Штернгеймера, см. п.4.5.1.). Кроме визуального микроскопического исследования применяется исследование с помощью автоматических и полуавтоматических анализаторов. 3.6.3. Подготовка осадка мочи и приготовление препаратов для микроскопического исследования: В лаборатории должна быть утверждена процедура подготовки осадка мочи и приготовления препарата для микроскопического исследования и процедура проведения самого микроскопического исследования в соответствии со стандартом. Каждый сотрудник должен выполнять все этапы анализа одинаковым способом и оценивать микроскопические элементы осадка, используя одни и те же критерии для идентификации. Объем мочи для центрифугирования, должен быть выбран в каждой лаборатории и использоваться постоянно, например, 10 мл; если в каких-либо случаях будут использоваться меньшие объемы (например, в педиатрии, неонаталогии), это отмечается в заключении. В центрифужную пробирку помещают около 10 мл из утренней порции мочи после тщательного ее перемешивания. Угловая скорость центрифугирования зависит от радиуса центрифуги. При использовании центрифуги радиусом 17 – 18 см (например, ОПН 1 и аналогичных) центрифугирование производится при угловой скорости 1500 об/мин в течение 10 мин. При использовании центрифуги другого радиуса мочу центрифугируют при 400 G также в течение 10 мин. Угловую скорость вращения ротора в об/мин либо рассчитывают по формуле, либо определяют по номограмме Доула и Котциаса. П р и м е ч а н и е - G – это относительное центробежное ускорение, которое зависит от радиуса центрифуги. В инструкции к современным центрифугам указывается радиус и формула пересчета центробежного ускорения в угловую скорость. Предлагается следующая формула пересчета: об/мин = [√(G/r х 1,118)] х 1000, где: G - относительное центробежное ускорение, r - радиус центрифуги в мм. Некоторые центрифуги автоматически переводят центробежное ускорение в угловую скорость. Затем быстрым опрокидыванием пробирки сливают надосадочную мочу (супернатант), оставляя только осадок, после чего 1 каплю осадка (приблизительно 40 мкл) переносят этой же пастеровской пипеткой на предметное стекло и покрывают покровным. Покровное стекло должно покрывать осадок полностью без пузырей. При избытке жидкости препарат становится многослойным, что затрудняет микроскопические исследования. При малом объеме мочи, например, у грудных детей, центрифугируют всю мочу, оставшуюся после анализа на диагностических полосках, сливают надосадочную жидкость и оставляют только осадок. Использование слайд-планшетов вместо предметных и покровных стекол создает более стандартизованные условия для микроскопии. Стандартизация приготовления препаратов осадка мочи позволяет получить сравнимые результаты микроскопического исследования в разных лабораториях. 3.6.4.Микроскопическое исследование нативного препарата осадка мочи. Изучение препарата начинают с малого увеличения (ок. х8 или х10, об. х10) для общего обзора, а более детальное изучение препарата с количественной оценкой элементов организованного и неорганизованного осадка производят при большом увеличении (ок. х8 или х10, об. х 40). Если элементы осадка встречаются в каждом просмотренном поле зрения, то количественную оценку выражают их числом в поле зрения, при небольшом количестве элементов, когда их встречают далеко не в каждом поле зрения, — числом в препарате (число в препарате оценивается при малом увеличении). Различают организованный и неорганизованный осадок. 3.6.4.1. Организованный осадок мочи. В организованном осадке мочи различают клетки 3-х видов эпителия (плоского, переходного и почечного), эритроциты, лейкоциты, цилиндры, грибы и бактерии. Клетки опухолей также относятся к организованному осадку мочи. Плоский эпителий. У мужчин плоский эпителий попадает в мочу только из нижней трети мочеиспускательного канала, и в моче здоровых мужчин он практически не встречается. У женщин плоский эпителий попадает в мочу из мочеиспускательного канала и влагалища, поэтому в женской моче он практически всегда присутствует. Плоский эпителий представляет собой крупные полигональные или округлые клетки с небольшим ядром, не окрашенные и не содержащие зернистости или включений. У девочек до пубертатного периода и у женщин в менопаузе плоский эпителий, попавший со стенок влагалища, более мелкий, ядро у него более крупное, что иногда приводит к ошибкам микроскопии. Плоский эпителий располагается в виде отдельных клеток или пластами. П р и м е ч а н и е 1 - В мочевом осадке практически всегда встречают клетки плоского эпителия от единичных в препарате до единичных в поле зрения. Диагностического значения клетки плоского эпителия не имеют. Переходный эпителий. Клетки переходного эпителия попадают в мочу из почечных лоханок, мочеточников, мочевого пузыря, мочеиспускательного канала. Эпителиальные клетки по размеру в 3-6 раз больше лейкоцита и отличаются выраженным полиморфизмом. В разных отделах мочевыводящих путей переходный эпителий отличается по размеру, форме клетки, количеству ядер. Так, клетки переходного эпителия мочевого пузыря - это крупные округлые клетки, содержащие от 1 до 3-х и более ядер. Общими признаками является окрашивание цитоплазмы в желтоватый цвет в результате контакта с пигментами мочи и наличие мелкой зернистости. Возможно появление в цитоплазме вакуолей и капель жира. П р и м е ч а н и е 2 - У здорового человека встречаются единичные клетки в препарате. Уведичение содержания переходного эпителия наблюдается при воспалительных заболеваниях мочевыводящих путей, предстательной железы, при интоксикации различной этиологии. При обнаружении большого количества переходного эпителия, не подтвержденного диагнозом, рекомендуется проводить цитологическое исследование. Почечный эпителий. Почечный эпителий попадает в мочу из канальцев нефронов. Морфологически он представляет небольшие клетки в 1,5-2 раза больше лейкоцита по диаметру, неправильной округлой, четырехугольной или овальной формы с достаточно крупным ядром. Так как эпителий имеет длительный контакт с пигментами мочи, он окрашен в различные оттенки желтого цвета. В клетках почечного эпителия выражены элементы дегенерации, которые проявляются крупной зернистостью (белковая дегенерация), часто закрывающей ядро, наличием вакуолей или капель жира. Клетки почечного эпителия располагаются в виде групп, цепочек или комплексов. В моче, содержащей билирубин, клетки почечного эпителия набухают и выглядят более крупными, округлыми и окрашенными билирубином. Наиболее частые лабораторные ошибки связаны с идентификацией почечного эпителия. При сложностях в дифференцировке клеток осадка мочи рекомендуется использовать суправитальную окраску, которая позволяет дифференцировать клетки осадка мочи. П р и м е ч а н и е 3 – Почечный эпителий появляется в результате поражения канальцев при заболеваниях почек, при различных видах интоксикации, в том числе лекарствами и токсинами, а также после наркоза. Жировое перерождение почечного эпителия свидетельствует о тяжести поражения. Лейкоциты. В моче здоровых людей лейкоциты встречаются практически всегда. Это небольшие круглые бесцветные или сероватые клетки, в 1,5-2 раза больше эритроцитов. Как правило, лейкоциты в моче представлены сегментно-ядерными нейтрофилами (95%), реже - лимфоцитами или эозинофилами. Выявление высокого содержания лейкоцитов на фоне бактериурии свидетельствует о пиурии (гной в моче). В препарате лейкоциты могут быть расположены отдельно или в виде скоплений. Присутствие скоплений необходимо отмечать в бланке исследований. П р и м е ч а н и е 4 ─ Количество лейкоцитов зависит от пола и возраста: у мальчиков до пубертатного периода они могут не встречаться, у взрослых обнаруживается 0-3 лейкоцита в поле зрения. П р и м е ч а н и е 5 ─ Содержание лейкоцитов в моче повышаются при заболеваниях почек и мочевыводящих путей инфекционно-воспалительного характера. П р и м е ч а н и е 6 ─ В моче с низкой относительной плотностью лейкоциты могут набухать, а в условиях резко щелочной реакции мочи - разрушаться. Эритроциты. Эритроциты по форме похожи на диски желтовато-зеленоватого цвета, содержат гемоглобин (неизмененные эритроциты). Эритроциты, утратившие гемоглобин, по форме похожи на кольца (измененные эритроциты). Эритроциты попадают в мочу из почек, мочевыводящих путей и половых органов. Почечное происхождение эритроцитов подтверждает наличие эритроцитарных цилиндров. П р и м е ч а н и е 7 – В моче здоровых людей допускается присутствие единичных эритроцитов в препарате. Измененные эритроциты встречаются в кислой моче. Деление эритроцитов на измененные и неизмененные не имеет первостепенного значения для решения вопроса об источнике гематурии. В резко щелочной моче эритроциты разрушаются. При большом количестве измененных эритроцитов в моче может обнаруживаться свободный гемоглобин. П р и м е ч а н и е 8 ─ Форма эритроцитов зависит от осмоляльности мочи. В моче с низкой относительной плотностью эритроциты увеличиваются в диаметре, в ряде случаев может наступить гемолиз. В моче с высокой плотностью эритроциты уменьшаются в размере, приобретают звездчатую форму. П р и м е ч а н и е 9 ─ Дифференцировать эритроциты мочи надо со спорами дрожжевых грибов и кристаллов оксалатов округлой и овальной формы. Споры грибов в отличие от эритроцитов чаще овальной формы, более резко преломляют свет, голубоватого цвета и почкуются. Овоидные оксалаты обычно, хотя и не всегда, имеют различную величину и резко преломляют свет. Прибавление к препарату осадка капли30% уксусной кислоты приводит к гемолизу эритроцитов, оставляя грибы и кристаллы оксалата кальция без изменения. П р и м е ч а н и е 10 ─ Гематурия может быть обнаружена при поражении паренхимы почки, при тяжелой физической нагрузке, при поражениях мочевыводящих путей, при почечно-каменной болезни, при неопластических процессах, при дисметаболической нефропатии и при передозировке антикоагулянтов непрямого действия. Цилиндры. Цилиндры представляют собой белковые и клеточные слепки почечных канальцев. В основе любого цилиндра находится белок, который выполняет функцию склеивающего материала. Белок в цилиндрах представлен гиалиноподобной массой, а при застое – восковидной. Различают следующие виды цилиндров: гиалиновые, зернистые, восковидные, эпителиальные, эритроцитарные, пигментные, лейкоцитарные. П р и м е ч а н и е 11. Для образования цилиндров необходимо соблюдение следующих условий: наличие белка в первичной моче, кислая реакция первичной мочи, нарушение оттока или застой мочи, нарушение кровоснабжения канальцев. Цилиндры обнаруживаются в кислой моче. В щелочной моче цилиндры растворяются. Гиалиновые цилиндры имеют нежные контуры, прозрачны, при ярком освещении плохо заметны. На поверхности может быть легкая зернистость за счет аморфных солей или клеточного детрита. Образуются из свернувшегося белка. П р и м е ч а н и е 12 - Появление гиалиновых цилиндров свидетельствует о развитии протеинурии, повышенной проницаемости клубочковых капилляров. В моче здорового человека могут быть обнаружены единичные гиалиновые цилиндры в препарате. Зернистые цилиндры имеют более резкие контуры и состоят из плотной зернистой массы желтоватого цвета, образуются при распаде клеток почечного эпителия в состоянии зернисто-белковой дегенерации. Восковидные цилиндры имеют резко очерченные контуры, плотную крупнозернистую структуру, имеют характерные трещины и разломы, желтую или слегка желтоватую окраску. Образуются из уплотненных гиалиновых и зернистых цилиндров при задержке их в канальцах. Наличие восковидных цилиндров свидетельствует о тяжелом длительном поражении почек. Эпителиальные цилиндры имеют четкие неровные контуры и состоят из клеток почечного эпителия, плотно расположенных на гиалиновой основе. Пигментные цилиндры могут быть обнаружены при гемоглобинурии и миоглобинурии; коричневого цвета, имеют сходство с зернистыми. Эритроцитарные цилиндры желтоватого цвета состоят из массы эритроцитов, образуются при почечной гематурии. Лейкоцитарные цилиндры серого цвета образуются из массы лейкоцитов, обнаруживаются при гнойных процессах в почках. П р и м е ч а н и е 13 – Кроме истинных цилиндров, образованных из белка и клеток, в мочевом осадке иногда встречаются ложные цилиндры - образования цилиндрической формы из аморфных солей, не имеющие практического значения. Эти образования растворяются при подогревании препарата или прибавлении к препарату капли 10% щелочи к кислой моче или 30% уксусной кислоты – к щелочной. П р и м е ч а н и е 14 — Цилиндрурия является симптомом поражения паренхимы почки: гиалиновые цилиндры подтверждают ренальную протеинурию, а лейкоцитарные и эритроцитарные - почечное происхождение лейкоцитурии и гематурии. 3.6.4.2. В осадке мочи могут быть обнаружены бластоспоры грибов рода Candida, которые необходимо дифференцировать с эритроцитами. В отличие от эритроцитов споры гриба почкуются, имеют голубоватый оттенок и более резко преломляют свет. Добавление капли 30% уксусной кислоты лизирует эритроциты, оставляя неизмененными споры гриба. В осадке мочи также могут быть выявлены бактерии, патогенные простейшие (например, трихомонады), некоторые гельминты и яйца гельминтов, что требует дальнейшего обследования пациентов и дополнительных исследований (микробиологических, паразитологических). 3.6.4.3. Неорганизованный осадок мочи. Неорганизованный осадок мочи – это соединения, выпавшие в осадок в виде кристаллов или аморфных масс. Характер осадка зависит от коллоидного состояния мочи, значения рН и некоторых других факторов. В кислой моче встречаются: мочевая кислота, ураты, кислый мочекислый натрий сульфат кальция, гиппуровая кислота. В кислой, нейтральной и щелочной моче встречаются: кислый мочекислый аммоний, оксалат кальция, В нейтральной и щелочной моче встречаются аморфные фосфаты. В щелочной моче встречаются: карбонат кальция, фосфат магния, В слабокислой, нейтральной и щелочной моче встречаются: магния аммония фосфат, фосфат кальция. Кристаллы аминокислот и других соединений, обнаруживаемые при патологии: - цистин, - лейцин, - тирозин, - холестерин, - билирубин, - гемосидерин, - гематоидин, - кристаллы лекарственных препаратов. 3.6.5. Микроскопическое исследование осадка мочи, окрашенного суправитально. Суправитальная окраска применяется при сложности дифференцировки клеточных элементов и цилиндров. Для суправитальной окраски используют краску Штернгеймера. Выпускается готовый набор реактивов для окраски осадка мочи по Штернгеймеру, состоящий из двух красителей. Рабочий раствор готовят смешиванием двух равных частей. Ход определения. Центрифугируют свежую утреннюю мочу. К 0.5 мл осадка прибавляют 1 каплю реактива, перемешивают и инкубируют 5 мин. Затем каплю окрашенного осадка помещают на стекло, покрывают покровным (или заполняют камеру слайд-планшета) и исследуют под микроскопом. Ядра клеток окрашиваются в синий цвет, цитоплазма – в розовый, гиалиновые цилиндры – в голубой, восковидные – в ярко-красный, зернистые - в бурый. |
Похожие:
 | Стандартизованная аналитическая технология клинического лабораторного анализа синовиальной жидкости |  | Для проведения общего анализа мочи собирают всю утреннюю порцию, которая в течение ночи собирается в мочевом пузыре |
| Этим и определяется значение физики в школьном образовании. Физика имеет большое значение в жизни современного общества и влияет... | | Проект «Универсальная электронная карта» имеет государственное значение, реализуется под контролем Министерства экономического развития... |
| География как учебный предмет в специальной (коррекционной) школе имеет большое значение для всестороннего развития обучающихся со... | | Структура раздела «Лабораторное исследование мочевыделительной системы» |
| Бухгалтерский учет имеет большое значение в деятельности предприятия. Он характеризует все стороны его функционирования, а также... | | Тема Определение суточного диуреза, водного баланса. Диагностическое значение |
| На данный момент существует большое количество государственных органов, имеющих полномочия по проведению проверок предпринимательской... | | В данной работе рассматривается сметная стоимость строительства и состав общих затрат инвестиционного проекта. Данная тема достаточно... |