После II этапа исследований на основании полученных данных составляют разделы в этикетки (бытовая и тарная) и инструкцию по применению педикулицида с характеристикой его токсичности и опасности, необходимых мер предосторожности с рекомендациями мер индивидуальной защиты, а также мер первой помощи при случайном отравлении.
На заключительном III этапе испытаний педикулицидных средств проводят испытания средства в практических условиях.
Практическим испытаниям обязательно подлежат средства на новых ДВ. Для средств на основе хорошо известных компонентов этап испытаний ограничивается апробацией его на ограниченной группе волонтеров (добровольцев), которые проводятся в соответствии с этическими принципами, сформулированными в Хельсинкской Декларации Всемирной Медицинской Ассоциации по проведению биомедицинских исследований на людях (1964 - 1996 гг.) (п. 8.2).
Испытания и оценку безопасности применения педикулицидов для борьбы с лобковым педикулезом следует проводить в кожно-венерологических диспансерах.
8.9.1. Перечень определяемых показателей для оценки
токсичности и опасности педикулицидных средств против
головного и лобкового педикулеза
Острая токсичность при введении в желудок (ЛД ).
50
cut
Острая токсичность при нанесении на кожу (ЛД ).
50
cut
Кожно-оральный коэффициент (K = ЛД / ЛД в желудок).
к/о 50 50
Острая ингаляционная опасность в насыщающих концентрациях паров (C ).
20
Ингаляционная опасность в режимах применения.
Местно-раздражающее действие на кожу.
Местно-раздражающее действие на глаза.
Кожно-резорбтивное действие.
Определение коэффициента возрастной чувствительности КВЧ по лимитирующим параметрам для животных разного возраста: половозрелого и неполовозрелого.
Сенсибилизирующее действие.
Эмбриотропное, тератогенное и мутагенное действия (по показаниям).
Испытания средства в практических условиях.
8.9.2. Методы определения и оценки токсичности и опасности
педикулицидных средств против головного
и лобкового педикулеза
8.9.2.1. Показатели острой токсичности
Определение среднесмертельной дозы при однократном введении в желудок
и нанесении на кожу (ЛД ), а также ингаляционной опасности в насыщающих
50
концентрациях паров (C ) рассмотрены в п. п. 8.2.2.1, 8.2.2.2 и 8.2.2.4.
20
8.9.2.2. Ингаляционная опасность в режимах применения
На втором этапе исследований препаративных форм, применяемых в виде аэрозолей, изучают токсичность при ингаляционном пути поступления педикулицида в организм с учетом режима применения: в норме расхода и 3 - 10-кратном ее завышении. Норма расхода состава устанавливается исходя из рекомендуемого режима применения. Это позволяет определить широту зоны токсического действия, класс опасности и условия применения средства на практике. Длительность эксперимента - 10 - 14 дней для средств эпизодического применения при ежедневной экспозиции - 4 ч. Животных обследуют в середине и по окончании эксперимента, регистрируя интегральные и специфические показатели состояния организма.
8.9.2.3. Определение и оценка местного раздражающего
действия на кожу
Местное раздражающее действие на кожу педикулицидов изучают при однократном и многократном нанесении на кожные покровы не менее двух видов животных. Общие рекомендации по проведению эксперимента даны в п. 8.9.2.6. Участок аппликации должен составлять 3% поверхности кожи человека, что при переносе на кожу лабораторных животных составляет: для крыс - 6 кв. см (2 x 3), для морских свинок - 9 кв. см (3 x 3), для кроликов - 25 кв. см (5 x 5). Правый бок служит для аппликации изучаемого средства, левый - для контроля. Сроки токсикологического эксперимента определяются продолжительностью применения педикулицидных средств в практике: для борьбы с головным и лобковым педикулезом (1 - 2-разовая обработка) - 2 недели (10 аппликаций). Однократная экспозиция средства составляет 30 - 60 мин. с учетом нормы расхода. В норме расхода исходят из расчета 30 - 50 мл (г) средства на кожу головы. Однократное нанесение соответствует одной норме расхода, трехкратное - трем нормам расхода, десятикратное - десяти нормам расхода.
Целесообразно проведение дробного нанесения средства с двумя перерывами по 4 дня по схеме: 3 аппликации, перерыв 4 дня, 3 аппликации, перерыв 4 дня и еще 4 аппликации.
В эксперименте на морских свинках или кроликах изучается также местно-раздражающее действие средства на скарифицированную кожу, имитируя поврежденную расчесами кожу. Для этого на предварительно выстриженные участки кожи иглой наносят царапины в виде решетки # до появления крови. Однократно наносят средство на один из поврежденных участков кожи, другой - служит контрольным. Ведется наблюдение за процессом полного заживления искусственных царапин в течение 1 - 2 недель.
Признаки раздражения кожи выявляются визуально, а также с помощью инструментов, фиксируя покраснение кожи, отек, сухость, шелушение и т.д. Выраженность эритемы оценивается визуально в баллах по классификации С.В. Суворова (п. 8.2.2.6, табл. 8.4, 8.5).
Изучение местного действия средств проводят как на освобожденном от шерсти участке кожи, так и непосредственно на шерстный покров с целью оценки действия на волосы. Для шерсти оценивают изменения цвета, блеска, ломкости, неравномерности роста, в т.ч. облысения.
Местный раздражающий эффект в условиях повторного опыта оценивают по той же классификации выраженности раздражающих свойств (табл. 8.4, 8.5) и показателям с дополнительной регистрацией сухости, шелушения, трещин, уплотнения кожи и т.д.
8.9.2.4. Определение и оценка местно-раздражающего
действия на глаза
Местно-раздражающее действие на глаза изучают в эксперименте на кроликах при однократном воздействии (без промывания и с промыванием глаз водой). После внесения средства в конъюнктивальный мешок глаз промывают из шприца (или резиновой груши) теплой питьевой водой в течение 1 - 2 мин.
Регистрацию изменений слизистой оболочки глаза, склеры и роговицы проводят визуально или с помощью офтальмоскопа сразу после воздействия, через час и ежедневно до исчезновения клинических признаков. Отмечают выраженность гиперемии и отека слизистой оболочки, инъекцию сосудов склеры, состояние роговицы, количество и качество выделений из глаза (классификации раздражающих свойств на глаза, п. 8.2.2.7, табл. 8.6, 8.7).
8.9.2.5. Определение и оценка кожно-резорбтивного действия
Общие подходы, см. п. 8.2.2.8. В качестве подопытных животных используются крысы. Для контроля берется отдельная группа животных. Участок аппликации должен составлять 3% поверхности кожи человека, что при переносе на кожу лабораторных животных составляет: для крыс - 6 кв. см (2 x 3). Изучаемое средство наносят на кожу животных в готовой форме или в рабочей концентрации (рекомендуемой для применения). Однократная экспозиция средства составляет 30 - 60 мин. с учетом нормы расхода. В норме расхода исходят из расчета 30 - 50 мл (г) средства на кожу головы. Однократное нанесение соответствует одной норме расхода, трехкратное - трем нормам расхода, десятикратное - десяти нормам расхода.
Кожно-резорбтивное действие оценивают при повторном (в течение
2 недель) воздействии на кожные покровы крыс с установлением по возможности
порога подострого действия (Lim ). Обследование подопытных животных
subac
проводят после 3 и 10 аппликаций средства. Показатели биологического
действия препарата выбирают с учетом направленности действия ДВ и активно
действующих ингредиентов.
8.9.2.6. Определение коэффициента возрастной
чувствительности КВЧ
Токсикологический эксперимент педикулицидных средств, предназначенных для использования детским контингентом, начиная с 3-летнего возраста, проводят на молодых животных (чаще потомство крыс), соответствующих возрасту ребенка, руководствуясь документом Фармкомитета. Эквиваленты возраста белых крыс и человека представлены в гл. 8, табл. 8.22. Наиболее оптимальным возрастом являются крысята-отъемыши 3-недельного возраста с массой тела 40 - 50 г, соответствующие 3-летнему возрасту ребенка. Обследование молодых животных осуществляют по окончании воздействия средства, используя комплекс тестов, характеризующих состояние основных органов и функций, включающих как интегральные, так и специфические показатели физиологического, биохимического и морфологического характера.
8.9.2.7. Определение и оценка сенсибилизирующих свойств
Оценку сенсибилизирующего действия педикулицидов проводят путем комплексной сенсибилизации с адъювантом Фрейнда по методу Алексеевой-Петкевич, сочетающей внутрикожную сенсибилизацию организма с накожными аппликациями (п. 8.2.2.11), или метод Е.П. Иевлевой (п. 8.4.2.4).
8.9.3. Перечень показателей и методы определения токсичности
и опасности педикулицидных средств против
платяного педикулеза
Острая токсичность при введении в желудок (ЛД ).
50
cut
Острая токсичность при нанесении на кожу (ЛД ).
50
cut
Кожно-оральный коэффициент (K = ЛД / ЛД в желудок).
к/о 50 50
Острая ингаляционная опасность в насыщающих концентрациях паров (C ).
20
Ингаляционная опасность в режимах применения.
Местное раздражающее действие на кожу.
Местно-раздражающее действие на глаза.
Кожно-резорбтивное действие.
Определение коэффициента возрастной чувствительности КВЧ по лимитирующим параметрам для животных разного возраста: половозрелого и молодого.
Сенсибилизирующее действие.
Оценка остаточных количеств средства на образцах материи.
Санитарно-гигиеническая оценка материалов, обработанных или импрегнированных средством.
Эмбриотропное, тератогенное и мутагенное действия (по показаниям).
Испытания средства в практических условиях.
Перечень показателей токсичности педикулицидных средств против платяного педикулеза включает те же параметры и показатели, что и для головного и лобкового педикулеза. Ниже приведены некоторые особенности изучения средств, предназначенных для борьбы с платяным педикулезом.
На первом этапе токсиколого-гигиенических исследований определяют ДВ в смывах с различных образцов материи или путем экстракции. Целью аналитических исследований является: обнаружение остаточных количеств ДВ; изучение интенсивности и динамики миграции из различных образцов материи. Исследования проводятся специалистом химиком-аналитиком.
8.9.3.1. Определение и оценка кожно-резорбтивного
действия средства
Кожно-резорбтивное действие средства в остром опыте оценивают по кожно-
оральному коэффициенту (K ), представляющему собой соотношение
к/о
среднесмертельной дозы при воздействии на кожу и введении в желудок.
Длительные токсикологические эксперименты на животных проводят в случае обнаружения потенциально опасных количеств ДВ (при дезинсекции вещей средством) и независимо от этого с импрегнантами белья.
Изучение кожно-резорбтивного действия средств проводят в субхроническом эксперименте в норме расхода средства и с 10-кратным ее завышением в течение 1 месяца при ежедневной 4-часовой экспозиции.
Длительность и объем токсикологических исследований указанных средств зависит от содержания средства в ткани по результатам санитарно-гигиенического анализа на разных видах материалов (хлопчатобумажных, шерстяных, синтетических), что обусловливает степень опасности педикулицида при контакте с кожей. Оценке подвергаются количества препарата, реально присутствующие на ткани, исходя из результатов санитарно-гигиенического анализа. В случае отсутствия остаточных количеств препарата на тканях токсикологический эксперимент не проводится.
Изучение токсического действия импрегнантов проводят с помощью пропитанных препаратом матерчатых попон, которые контактируют с кожей животных в течение 7 - 10 суток (с учетом носки белья до стирки). Затем попоны стирают, вновь импрегнируют и одевают на аналогичный срок.
8.9.3.2. Санитарно-гигиеническая оценка материалов,
обработанных или импрегнированных педикулицидами
Для средств, предназначенных для борьбы с платяным педикулезом (в т.ч. импрегнирования белья), необходимо проведение санитарно-гигиенического исследования различных образцов материалов: хлопчатобумажных, шерстяных, синтетических.
К гигиеническим свойствам материи, в основном, относят: воздухопроницаемость, электризуемость, гигроскопичность, испаряемость и др. Перечисленные показатели имеют важное значение в формировании пододежного микроклимата и определения условий терморегуляции организма.
На первом этапе токсиколого-гигиенических исследований педикулицидов вначале проводят экспертную оценку различных образцов материи, подвергнутых дезинсекции или импрегнированных препаратами, в сопоставлении с ее контрольными образцами (визуальную, органолептическую по балльной системе). Регистрируют наличие стойкого специфического запаха, изменение окраски и нарушение прочности материалов. При отсутствии перечисленных признаков, делают заключение о возможности применения педикулицидного препарата и ограничивают исследования первым этапом. В противоположном случае переходят ко второму этапу гигиенических исследований.
На втором этапе углубленного исследования проводят изучение физико-химических свойств материалов, подвергнутых дезинсекции или импрегнации препаратом, в соответствии с "Методическими указаниями по гигиенической оценке одежды и обуви из полимерных материалов" [54]. Физико-гигиенические исследования тканей должны проводиться с учетом их сорбционных свойств сохранения дезинсектанта материей с целью рекомендаций по преимуществу обработки того или иного текстильного материала конкретным препаратом.
Критериями гигиенической оценки материалов, подвергнутых дезинсекции или импрегнации педикулицидами, являются:
- стойкость специфического запаха, придаваемая материалам;
- изменение физико-гигиенических свойств тканей (воздухопроницаемость, испаряемость, гигроскопичность), которые нарушают нормальные физиологические реакции организма;
- отсутствие роста патогенной микрофлоры;
- отсутствие повреждающего действия на внешний вид материи.
Санитарно-гигиенические показатели учитываются при обосновании безопасных условий применения педикулицидов.
8.9.4. Испытания средства в практических условиях
До этапа широких практических испытаний целесообразно проведение ограниченных испытаний на волонтерах с оценкой состояния кожных покровов: pH, температура кожи, электросопротивляемость и другие физиологические и гигиенические показатели. При необходимости проверяются на добровольцах аллергенные свойства изучаемого средства (кожные пробы, "лоскутная проба", пробы in vitro и др.).
Положительные результаты этого этапа позволяют перейти к широким практическим испытаниям педикулицидов против головного и лобкового педикулеза, а также для средств, предназначенных для дезинсекции вещей и импрегнантов, для которых проводятся клинико-гигиенические исследования на волонтерах под наблюдением врачей основных специальностей: терапевта, дерматолога, аллерголога, невропатолога и др. Испытания проводятся в соответствии с этическими принципами, сформулированными в Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации по проведению биомедицинских исследований на людях 1964 - 1996 гг. (п. 8.2).
При положительных результатах практических испытаний средство рекомендуют для регистрации и внедрения в практику.
Наличие острых субъективных и объективных реакций на воздействие средства более чем у 5% испытуемых, а также сдвиги в физиологических и биохимических показателях у волонтеров (опытной группы) в сравнении с контрольной, с учетом противопоказаний, является основанием к пересмотру рекомендованных режимов применения средства или его рецептуры.
|
