Изучение структурных компонентов и физико-химических свойств гуминовых веществ низкоминерализованных иловых сульфидных грязей как источника антиоксидантных лекарственных средств
Скачать 402.6 Kb.
|
Про- и антиоксидантные свойства гуминовых веществ пелоидов условиях in vivo. Эксперимент выполнен на беспородных крысах самцах половозрелого возраста. При проведении опытов неуклонно соблюдали положения Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным [Касаткина Т.Б., 2000]. Животные содержались на стандартном лабораторном рационе в условиях свободного доступа к пище и воде. Экспериментальные исследования проведены в соответствии с правилами лабораторной практики (GLP), Приказом МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г «Об утверждении правил лабораторной практики», Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ (2005г.).Оценка антиоксидантной активности исследуемых соединений проведена в модели острой интоксикации при парентеральном и пероральном введении отдельных фракций гуминовых веществ в дозе 1 мг/кг массы, хемилюминесцентным методом на приборе «Хемилюминометр – ХЛ-003». Контролем служила группа интактных животных. Острую интоксикацию вызывали однократным внутрижелудочным введением отечественной смеси полихлорированных бифенилов (ПХБ) «Совол» в оливковом масле в дозе 600 мг/кг (0,1 LD50). Данная группа животных составила группу сравнения. Полихлорированные бифенилы значительно активизируют процессы свободнорадикального окисления (СРО). Все показатели СРО достоверно изменялись по сравнению с контрольной группой (рис.4): светосумма, отражающая скорость расходования свободных радикалов за счет их взаимодействия с антиоксидантами, увеличилась на 60%; амплитуда быстрой вспышки, характеризующая содержание гидроперекисей, увеличилась на 11%; латентный период времени, определяющий скорость окисление липидов понизился на 33%. Введение растворов компонентов гуминовых веществ сопровождалось статистически значимыми изменениями изучаемых параметров. В сравнении с животными, подвергшимися интоксикации «Соволом», у них наблюдалось снижение спонтанной светимости на 30,31% под действием гиматомелановых и на 52,38% –фульвовых кислот.  а) б)   Рис 4. Значения параметров хемилюминесценции плазмы крови на а) 3 сутки и б) 10 сутки исследования Латентный период увеличился при введении крысам гиматомелановых и гуминовых кислот на 74% и 83% соответственно. Спонтанная светимость снизилась в 2-3 раза под действием гиматомелановых и гуминовых кислот пелоидов. Значения светосуммы также имели тенденцию к понижению. Таким образом, наибольшей способностью угнетать свободнорадикальное окисление модельной системы, а значит, более высокой антиоксидантной активностью обладают гуминовые и гиматомелановые кислоты. Данные Fe2+– индуцированной хемилюминесценции подтверждали результатами определения ТБК-реагирующих продуктов.  Рис. 5. Содержание ТБК-РП в плазме крови крыс при интоксикации соволом и коррекции гуминовыми веществами на 3 и 10 сутки исследования Максимальная концентрация продуктов тиобарбитуровой кислоты на третьи сутки в группе сравнения указывает на интенсификацию процессов свободнорадикального окисления липидов, которое несколько снижается (на 10 сутки) вследствии включения антиоксидантных защитных систем организма (рис. 5). Применение компонентов гуминовых веществ вызывает понижение уровня ТБК-реагирующих продуктов по отношению к группе сравнения на 24% при использовании фульвовых, на 63,7% - гиматомелановых, на 43,0% - гуминовых и 46,8% - гумусовых кислот пелоидов. Влияние гуминовых веществ пелоидов на ферментативное звено антиоксидантных систем исследовали по активности супероксиддисмутазы (СОД), каталазы и глутатионперокидазы (ГПО) до и после интоксикации бифенилами (табл.7). Таблица 7 Влияние гуминовых веществ на активность окислительно- восстановительных ферментов в модели окислительного стресса
Введение «Совола» достоверно снижает активность всех антиоксидантных ферментов. При лечении экспериментальных животных растворами гуминовых веществ пелоидов уже к 3-им суткам наблюдалось повышение активности глутатионпероксидазы, супероксиддисмутазы и каталазы, которая достигало нормативных значений. Таким образом, определение количественных характеристик хемилюминесценции, ТБК-реагирующих продуктов и показателей основных антиоксидантных ферментов плазмы крови подтвердило, что свободнорадикальное окисление поддается коррекции при введении гуминовых веществ пелоидов. Объективным критерием оценки антиоксидантной активности являются гистологические исследования. Гистологическая картина свидетельствует о том, что при моделировании окислительного стресса у крыс в печени развиваются выраженные патологические изменения, такие как гибель эпителиоцитов, нарушение радиального расположения печеночных балок и разрыв анастомозов между ними, изменение формы и размеров гепатоцитов. Часть гепатоцитов лишена ядер или находится в состоянии гидропической и баллонной дистрофии и характеризуется отсутствием гликогена в гепатоцитах печеночных долек. На десятые сутки в центральных зонах печеночных долек формируются очаги некроза с усилением венозного застоя (рис.6).   
Под влиянием фульвовых, гиматомелановых, гуминовых и гумусовых кислот на 3 сутки происходит уменьшение патологических изменений: синусоиды гемокапилляров умеренно расширены, причем степень расширения уменьшается от центра к периферии, в стенках сосудов и желчных протоков дистрофические изменения носят очаговый характер, большинство гепатоцитов имеют нормальную форму, размеры и структуру (рис.7). На 10 сутки в клетках обнаруживается гликоген, очаги некроза отсутствуют, структура стенки междольковых артерий и желчных протоков в триадах практически не отличается от структуры ткани печени крыс контрольной группы (рис. 8). Таким образом, для коррекции метаболических нарушений при острой интоксикации использованы антиоксидантные препараты группы гуминовых веществ. Экспериментальные данные, полученные различными физико-химическими и химическими методами подтверждают антиоксидантную активность гуминовых веществ пелоидов, которая возрастает в ряду фульвовых, гумусовых, гуминовых, гиматомелановых кислот низкоминерализованных иловых сульфидных грязей. |
Похожие:
 | Определение физико-химических свойств биологических субстратов (например, общий анализ крови, мочи, мокроты; биохимическое исследование... | | Общая характеристика продуцентов биологически активных веществ и лекарственных препаратов. 2 |
| Защита состоится «26» декабря 2012 г в 1300 на заседании диссертационного совета д 212. 074. 03 при Иркутском государственном университете... |  | Химическая система – совокупность микро и макро количеств веществ, способных воздействием внешних факторов (условий) к превращениям... |
| Все материалы по химической основе делятся на две основные группы — металлические и неметаллические. К металлическим относятся металлы... | | Лицензирование лекарственных средств и изделий медицинского назначения включает в себя три этапа: экспертизу, специализированную... |
| А. (1942) и под руководством или при участии которого было впервые синтезировано девять А. Выделение А. в специальное семейство связано... | | Задание Понятие о фармакодинамике и фармакокинетике лекарственных средств. Всасывание веществ с места введения. Основные механизмы... |
| А. (1942) и под руководством или при участии которого было впервые синтезировано девять А. Выделение А. в специальное семейство связано... | | Действующим законодательством незаконный оборот наркотических средств, психотропных веществ и их прекурсоров, а также потребление... |