Тезисы докладов VIII международной конференции. Москва, 4-6 октября 2010 г. М.: Рудн, 2010. 558 с. Isbn 978-5-209-03871-9 в сборнике представлены тезисы докладов vie международной конференции «Биоантиоксидант»
Скачать 6.8 Mb.
|
МОЛЕКУЛЯРНО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ АНТИОКСИДАНТОВ НА ТРАНСФОРМИРОВАННЫЕ И ЭМБРИОНАЛЬНЫЕ КЛЕТКИ Гамалей И.А., Воронкина И.В., Кирпичникова К.М., Филатова Н.А. Институт цитологии РАН, г. Санкт-Петербург,194064, Тихорецкий пр., 4; тел: 812-4973802; igamaley@mail.cytspb.rssi.ru Использование антиоксидантов в медицинских целях не теряет актуальности. При исследовании прямого действия антиоксидантов на трансформированные клетки мы обнаружили, что действие ряда антиоксидантов (N-ацетилцистеина (NAC), альфа-липоевой кислоты (ALA), глутатиона и мелатонина) частично нормализует трансформированный фенотип различных клеток (фибробластов 3Т3-SV40, эпидермоидной карциномы А431, клеток карциномы HeLa и гепатомы МГ22а). Нормализация выражается в том, что после действия антиоксиданта трансформированные клетки значительно уменьшают или теряют вообще чувствительность к литической активности естественных киллерных клеток (ЕКК), т.е. становятся похожими по этому показателю на нормальные клетки. Литическая активность ЕКК – один из показателей иммунного статуса организма. ЕКК – это не сенсибилизированные большие гранулярные лимфоциты, осуществляющие независимый от антител и комплемента лизис широкого спектра клеток-мишеней – опухолевых, зараженных вирусами и некоторых нормальных. Мы показали, что и эмбриональные клетки мыши, чувствительные к литическому действию ЕКК, тоже теряют эту чувствительность, если их обработать антиоксидантом (факт, важный для трансплантологов, стремящихся к уменьшению этой чувствительности). Кроме того, изучали действие антиоксиданта на еще один показатель – образование опухоли клетками перевиваемой линии (МГ22а) после введения их сингенным животным. Клетки МГ22а, обработанные одним из указанных антиоксидантов, теряют или значительно уменьшают (в зависимости от антиоксиданта и его дозы) способность образовывать опухоли у сингенных мышей, что подтверждает способность антиоксидантов вызывать реверсию трансформированного фенотипа. Мы предприняли попытку найти какие-либо мишени действия антиоксиданта в клетках, могущих влиять на их поверхностные свойства (в частности, быть узнаваемыми ЕКК). Исследовали: изменения редокс-баланса клетки, структурные изменения актинового и тубулинового цитоскелета, а также активность матриксных металлопротеиназ (ММР), секретируемых клетками во внеклеточную среду. Большая часть экспериментов была поставлена с NAC и ALA. Нам удалось показать следующее: 1) изменение редокс-баланса клеток в присутствии антиоксиданта не является главной причиной изменения ее функциональной чувствительности к действию ЕКК; 2) изменение чувствительности клеток к действию ЕКК сопровождается реорганизацией актинового цитоскелета, хотя одного этого события недостаточно для изменения фенотипа клетки; 3) антиоксиданты NAC и ALA по-разному меняют активность матриксных металлопротеиназ ММП-2 и ММП-9 и включают разные сигнальные пути клетки, имеющие разные следствия на функциональном уровне. На эмбриональных клетках и фибробластах 3Т3-SV40 мы показали, что изменение их чувствительности к ЕКК коррелирует с изменением соотношения ММП-2 и ММП-9. Мы предполагаем, что реорганизация цитоскелета клетки, необходимая для изменения трансформированного фенотипа, происходит при обязательном участии ММП и изменении структуры внеклеточного матрикса. Работа поддержана РФФИ (проект 09-04-00467). ВЛИЯНИЕ ЭКЗОГЕННОЙ ПЕРЕКИСИ ВОДОРОДА НА АНТИОКСИДАНТНУЮ СИСТЕМУ ХЛОРОПЛАСТОВ ПШЕНИЦЫ Гамбарова Н.Г., Гинс В.К. Бакинский Государственный Университет, Азербайджанская Республика, г. Баку, Е-mail: nailya-gambarova@rambler.ru Всероссийский научно-исследовательский институт селекции и семеноводства овощных культур,143080, п. ВНИИССОК, Московская область, Россия; vniissok@mail.ru. В настоящее время пероксид водорода рассматривается не только как активный участник неспецифического окислительного стресса, но и как вторичный мессенджер, регулирующий развитие защитных реакций растения на действие неблагоприятных факторов среды. В ряде работ показана его способность повышать устойчивость растений к окислительному стрессу путем усиления активности антиоксидантных (АО) ферментов. Однако ответ АО-системы изолированных хлоропластов пшеницы на действие экзогенной Н2О2 является практически мало изученным. Нами исследовано влияние различных концентраций (1 мМ и 10 мМ) экзогенно введенного пероксида водорода (Н2О2)в течение 15, 30, 45 и 60 минут на активность супероксидисмутазы (СОД), глутатионредуктазы (ГР) и глутатионтрансферазы (ГТ) в хлоропластах пшеницы сорта Шарг, характеризующейся термоустойчивостью. Представленные на рисунке 1 данные свидетельствуют о способности Н2О2 к регуляции активности хлоропластной СОД вне зависимости от её синтеза de novo. В качестве возможного механизма активации предполагается взаимодействие Н2О2 с активным центром фермента. Показана возможность усиления активности супероксиддисмутазы и глутатионтрансферазы в условиях, исключающих возможность их синтеза, что обуславливает дополнительную защиту пластид в ранние сроки действия экстремальных факторов.  Рис. 1. Активность СОД в хлоропластах пшеницы сорта Шарг при обработке экзогенным пероксидом водорода. АКТИВНОСТЬ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ, ПЕРОКСИДАЗЫ И КАТАЛАЗЫ В ЛИСТЬЯХ ДРЕВЕСНЫХ РАСТЕНИЙ В УСЛОВИЯХ ТЕХНОГЕННОГО СТРЕССА Гарифзянов А.Р., Иванищев В.В. Тульский государственный педагогический университет им. Л.Н. Толстого, г. Тула (300026, г.Тула, проспект Ленина, 125; тел.: 89030361082; e-mail: Garifzyanov86@yandex.ru) Наиболее опасным последствием произрастания древесных растений в техногенно загрязненных условиях можно считать развитие окислительного стресса, сопровождающегося избыточной генерацией активных форм кислорода (АФК). В детоксикации АФК принимают участие разнообразные антиоксиданты, среди которых важнейшую роль играют ферменты - каталаза (КАТ) и пероксидаза (ПО). В рамках проводимого исследования была изучена активность ПО и КАТ в листьях Sorbus aucuparia L, Acer platanoides L, Populus nigra L, Aesculus hippocastanum L, Tilia cordata Miller, Larix sibirica Ledeb, Betula pendula Roth, произрастающих в условиях санитарно-защитных полос (СНП) металлургических предприятий г.Тула. Почвы СЗП характеризуются превышением ПДК по содержанию ряда тяжелых металлов: Mn (в 4,7 раза), Ni (в 1,2 раза), Pb (в 1,5 раза), Zn (в 2 раза) и Cd (в 6 раз). Об интенсивности перекисного окисления липидов (ПОЛ) судили по накоплению малонового диальдегида (МДА), реагирующего с тиобарбитуровой кислотой (специфическое поглощение при 560 нм). Активность ПО определяли спектрофотометрическим методом в фосфатно-буферном экстракте с пирогаллолом по изменению поглощения (430 нм) во времени (миллимолярный коэффициент экстинкции образующегося пурпурогаллина равен 2,47). Определение активности КАТ проводили манометрическим методом по количеству выделяющегося кислорода. Произрастание древесных растений в условиях техногенного загрязнения приводило к активации ПОЛ. В листьях исследованных растений наблюдали возрастание активности ПОЛ на 26-43% в зависимости от вида. Наибольшее увеличение было зафиксировано для Populus nigra (на 43%), наименьшее – для Larix sibirica (на 26%). Усиленное ПОЛ и накопление МДА может привести к нарушению целостности мембраны и повреждению клетки. В условиях окислительного стресса время жизни образовавшихся АФК и их токсическое действие контролируется системой антиоксидантной защиты клетки, т.е. соответствующими ферментами и метаболитами. Проведенное исследование показало, что ферментативная активность в листьях древесных растений в условиях техногенного стресса значительно изменялась. При этом для Tilia cordata, Acer platanoides, Populus nigra и Betula pendula выявлено увеличение активности ПО в 5-16, 11-14, 2-5 и 6 раз соответственно. Для Sorbus aucuparia, напротив, выявлено снижение активности этого фермента в условиях стресса. В образцах листьев, собранных в контрольной точке, активность ПО (0,39±0,04 мкмоль/мин*г) была в 14-23 раза выше, чем в техногенно измененных условиях. Изменение активности КАТ в условиях техногенного стресса также было разнонаправленным. Для Sorbus aucuparia и Betula pendula характерным было увеличение активности КАТ на 31% и 21-27% соответственно. Для Tilia cordata и Acer platanoides достоверных изменений в активности КАТ выявлено не было. Таким образом, проведенное исследование показало, что произрастание древесных растений в техногенно загрязненной среде приводит к развитию окислительного стресса, сопровождающегося увеличением ПОЛ и разнонаправленностью изменений активности ПО и КАТ. АНТИОКИСЛИТЕЛЬНАЯ СПОСОБНОСТЬ ЭКСТРАКТОВ ТРАВЯНЫХ СБОРОВ, ПРИМЕНЯЕМЫХ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВЕГЕТО-СОСУДИСТОЙ ДИСТОНИИ Гарифуллина Г.Г., Герчиков А.Я., Сафарова И.В., Никитина Т.И. Башкирский государственный университет, Уфа Россия, Республика Башкортостан, 450074 г.Уфа, ул. Заки Валиди, 32.Тел.: +7(347) 273 67 27, Garifa@ inbox.ru. В последнее десятилетие значительно возрос интерес к лекарственным препаратам растительного происхождения, обладающих высокой терапевтической эффективностью и характеризующихся при этом меньшими побочными эффектами, что выгодно отличает такие препараты от их синтетических аналогов. Исследованы экстракты травяных сборов трех видов: А - матричный сбор из семи растений; В - сбор из двенадцати растений для понижения артериального давления; С - сбор из десяти растений для повышения артериального давления. Особенность этих сборов заключается в том, что они составлены на базе растений, произрастающих на территории Башкирии. В составе сборов идентифицированы следующие флавоноиды: рутин, кверцитин, апигенин, гиперозид, лутеолин. Установлен терапевтический эффект исследованных сборов в клинической практике. В качестве модельного субстрата окисления использовали изопропанол, при окислении которого образуются гидроксильные радикалы. Скорость поглощения кислорода измеряли с помощью дифференциальной манометрической установки. В качестве инициатора окисления применяли азодиизобутиронитрил. Введение экстрактов травяных сборов в окисляющийся в инициированном режиме изопропиловый спирт при 75 приводит к снижению скорости поглощения кислорода. Увеличение концентрации экстрактов, вводимых в окисляемый субстрат, приводит к снижению скорости окисления. Для экстрактов А и С при концентрациях больше чем 6×10-3 г/л скорость поглощения кислорода перестает зависеть от концентрации добавок, что позволило вычислить стехиометрический коэффициент ингибирования, который оказался близок к 2. Полученное значение характерно для ингибиторов фенольной природы. Таким образом, комплексные препаратов для лечения вегето-сосудистой дистонии тормозят реакцию радикально-цепного окисления изопропилового спирта в режиме инициированного окисления изопропилового спирта. Установлен ряд эффективности антиокислительного действия экстрактов: А>C>В; следовательно, базовый сбор оказывает наибольший ингибирующий эффект. Учитывая тот факт, что режим окисления остается цепным, вычислена эффективная константа скорости ингибирования для изученных экстрактивных веществ. . По литературным данным константа скорости взаимодействия изопропанола с НO2· равна k2 = 26,6 л/моль×с. Тогда величина k7 = 8,0*104 и 6,9*104 л/моль×с для сборов А и С соответственно. Следует отметить, что полученные значения k7 представляют собой эффективную величину, где k7 есть константа, отражающая ингибирующие свойства экстрактивных веществ. По величине эффективной константы скорости реакции ингибирования изученные экстракты следует отнести к ингибиторам средней активности. ДОЛГОЖИВУЩИЕ РАДИКАЛЫ АМИНОКИСЛОТ КАК ИСТОЧНИК ОБРАЗОВАНИЯ ПЕРЕКИСИ ВОДОРОДА В ВОДНОЙ СРЕДЕ Гармаш С.А.1,2, Карп О.Э.1, Гудков С.В.1,2, Брусков В.И.1,2 1Учреждение Российской Академии Наук Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, г. Пущино, 142290, Моск. обл., г. Пущино, ул. Институтская, д.3, (4967)739497, e-mail: bruskov_vi@rambler.ru 2Пущинский государственный университет, Пущино, Россия Известно, что ряд белков и аминокислот являются природными антиоксидантами. С другой стороны, установлено, что под воздействием ионизирующей радиации образуются долгоживущие радикалы белков, которые являются посредниками при развитии окислительного стресса в результате длительной генерации активных форм кислорода в водных растворах. Цель данной работы заключалась в исследовании возможности образования под действием ионизирующей радиации долгоживущих радикалов L-аминокислот и оценке их прооксидантного потенциала. С помощью индуцированной рентгеновским излучением люминесценции исследована способность L-аминокислот к образованию долгоживущих радикалов аминокислот (ДЖРА). Исследованные водные растворы аминокислот по величине индуцированной рентгеновским излучением люминесценции можно разделить на две группы. Группа 1 – умеренно люминесцирующие аминокислоты (Gly, Arg, Met, Pro, Phe). Группа 2 – аминокислоты, обладающие наиболее интенсивной люминесценцией (Ser, Thr, Val, Ile, Leu). Исключением является Cys, который не люминесцирует после воздействия ионизирующей радиации. Интенсивность люминесценции ДЖРА линейно зависит от поглощенной дозы рентгеновского излучения. Время полужизни ДЖРА, определяемое по уменьшению величины люминесценции в водном растворе составляет 2-6 часов. Способность ДЖРА к генерации перекиси водорода в водных растворах исследована с помощью метода усиленной хемилюминесценции в системе: «люминол-4-йодфенол-пероксидаза». Сухие навески облученных аминокислот растворяли в воде непосредственно перед экспериментом. Установлено, что все исследованные ДЖРА способны к генерации перекиси водорода в водных растворах. По способности генерировать перекись водорода ДЖРА разделены на 3 группы: 1 – аминокислоты обладающие высокой продукцией Н2О2 – Val и Leu; 2 – приводящие к умеренной продукции перекиси водорода – His, Ser, Ile, Thr; 3 – слабо способные к генерации перекиси водорода – Pro, Arg, Met, Phe. Таким образом, установлено, что протеиногенные аминокислоты после воздействия ионизирующей радиации способны проявлять прооксидантные свойства в результате длительной генерации Н2О2 в водном растворе. Работа поддержана грантами Российского фонда фундаментальных исследований (10-04-00949-а; 10-04-00800-а) и Президента Российской Федерации для поддержки молодых российских ученых (МК-108.2010.4). ВЛИЯНИЕ БОКОВЫХ ЗАМЕСТИТЕЛЕЙ В СТРУКТУРЕ СИНТЕТИЧЕСКИХ АНТИОКСИДАНТОВ НА ИХ МЕМБРАНОТРОПНЫЕ СВОЙСТВА. Гендель Л.Я. Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, 117977, Москва, ул. Косыгина, 4,+7-495-939-7114, lgendel@yandex.ru На основе сформулированного нами ранее Принципа соответствия рассмотрены важные для конструирования синтетических антиоксидантов, лекарств и других биологически активных веществ (БАВ) взаимосвязи структуры и гидрофобных свойств вещества с его мембранным транспортом, распределением в биомембране и осуществлением биологического действия. С использованием методов спиновых зондов и сканирующей электронной микроскопии, синтетических антиоксидантов из разных химических классов (производных пространственно-затрудненных феноло, 5-гидроксибензимидазола и др.), а так же спин-меченых неэлектролитов (моделирующих поведение БАВ) показано, что на кинетику встраивания гомологов в биомембрану, селективность распределения во внутримембранном пространстве и ёмкость мембраны для этих соединений оказывают существенное влияние различные по гидрофобным свойствам боковые заместители, введенные в структуру исходного соединения ряда. Определен вклад заместителей в гидрофобность гомологов, теоретически оценены коэффициенты распределения гомологов в системе октанол-вода. Выявлены изменения морфологии эритроцитов и структурные модификации эритроцитарной мембраны, индуцируемые различными по гидрофобности синтетическими антиоксидантами. Установлен немонотонный характер зависимостей модифицирующего действия мембранного транспорта ихфанов на мофологию эритроцитов, структуру эритроцитарной мембраны и целостность эритроцитарных клеток от гидрофобных свойств представителей этого гомологического ряда соединений. |
Похожие:
 | Е-86. VII международная Кондратьевская конференция «Контуры экономики будущего», тезисы участников конференции. Международный фонд... | | Современный менеджмент: проблемы и перспективы: тезисы докладов науч практ конф. 10 апреля 2008 г./ Ред кол.: В. И. Малюк (отв ред.)... |
| Желающие принять заочное участие в конференции (с публикацией в сборнике научных трудов) должны направить до 31 августа 2013 г. (включительно)... | | Желающие принять заочное участие в конференции (с публикацией в сборнике научных трудов) должны направить до 3 (третьего) марта 2014... |
 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования | | Сборник докладов международной научной конференции «Российская политика соседства» (Москва, 12-13 октября 2007 г.) |
| Цикличность глобальных процессов, циклы Кондратьева и долгосрочная концепция развития России и глобального мира | | Шестого научного конгресса студентов и аспирантов «инжэкон-2013». Доклады студентов и аспирантов представляют результаты научных... |
| В 2001-2002 годах Фонд «Возрождение Земли Сибирской» организовал два дистанционных курса для некоммерческих организаций России и... | | Доклады и тезисы IV международной научной конференции испанистов 1 – 4 апреля 2010 года, мгимо (Университет) мид россии / Отв редактор... |