Московский государственный медико-стоматологический университет

Скачать 0.89 Mb.

Название	Московский государственный медико-стоматологический университет
страница	6/7
Тип	Учебное пособие

filling-form.ru > бланк резюме > Учебное пособие

1 2 3 4 5 6 7

РЕЗЮМЕ ГЛАВЫ

Мезенхимальные клетки-предшественники

Отличительные черты клеток-предшественников и стволовых - стволовая клетка при делении образует еще одну стволовую клетку и специализированную клетку. Клетка-предшественник уже частично специализирована и при делении образует две специализированные клетки.

Иммуномодулирующий эффект мезенхимальных стволовых клеток:

подавляют размножение стимулированных Т-клеток
подавляют пролиферацию В-лимфоцитов и угнетают синтез антител, рецепторов хемокинов, осуществляемый активированными В-клетками
препятствуют дифференцировке моноцитов в незрелые дендритные клетки и созреванию незрелых дендритных клеток, угнетают экспрессию дендритными клетками костимуляторных молекул и цитокинов
влияют на функции естественных киллеров (снижение секреции интерферона g, снижение пролиферации неактивных NK-клеток)

Список литературы

Использованная литература:

Powledge T.M. The polymerase chain reaction. Adv Physiol Educ. 2004; 28: 44–50. Полимеразная цепная реакция.
Webber R.J., Rodriguez J.G., Webber D.S., Dunnebacke T.H. Development, characterization, and epitope mapping of a panel of twenty-four monoclonal antibodies specific for human inducible nitric oxide synthase. Hybridoma (Larchmt). 2005 Feb; 24(1): 6-13.
Donnelly J.J., Wahren B., Liu M.A. DNA vaccines: progress and challenges. J Immunol. 2005 Jul 15; 175(2): 633-9.
Souza A.P., Haut L., Reyes-Sandoval A., Pinto A.R. Recombinant viruses as vaccines against viral diseases. Braz J Med Biol Res. 2005 Apr; 38(4): 509-22.
Lal P., Ramachandran V.G., Goyal R., Sharma R. Edible vaccines: current status and future. Indian J Med Microbiol. 2007 Apr; 25(2): 93-102.
Johnston S.L. Biologic therapies: what and when? J Clin Pathol. 2007 Jan; 60(1): 8-17.
Deb K.D., Sarda K. Human embryonic stem cells: preclinical perspectives. J Transl Med. 2008;6:7.
Galic Z., Kitchen S.G., Kacena A., Subramanian A., Burke B., Cortado R., Zack J.A. T lineage differentiation from human embryonic stem cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006 Aug 1;103(31):11742-7.
Fleming H.E., Scadden D.T. Embryonic stem cells make human T cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006; 103(33): 12213-4.
García J.M., Español T., Gurbindo M.D., Casas C.C. Update on the treatment of primary immunodeficiencies. Allergol Immunopathol (Madr). 2007 Sep-Oct;35(5):184-92.
Dazzi F., van Laar J.M., Cope A., Tyndall A. Cell therapy for autoimmune diseases. Arthritis Res Ther. 2007;9(2):206.
Tyndall A., Walker U.A., Cope A., Dazzi F., De Bari C., Fibbe W. et al. Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells: a review based on an interdisciplinary meeting held at the Kennedy Institute of Rheumatology Division, London, UK, 31 October 2005. Arthritis Res Ther. 2007;9(1):301.
Trivedi P., Hematti P. Derivation and immunological characterization of mesenchymal stromal cells from human embryonic stem cells. Exp Hematol. 2008 Mar; 36(3): 350-9.

Рекомендуемая литература:

Патологическая физиология. Учебник под ред. В.В.Новицкого, Е.Д.Гольдберга, О.И.Уразовой. Москва, «Гэотар-мед», 2009.
Г.-Р. Бурместер, А. Пецутто с участием Т. Улрихса и А.Айхер. Наглядная иммунология. Москва, «Бином. Лаборатория знаний», 2007

Рабочая тетрадь и руководство к методическому пособию
Цели изучения

После изучения данного методического пособия, обучающийся:

Получит представление о принципах метода полимеразной цепной реакции (ПЦР), а также о его применении в медицине и биологии. См. стр. 4-10 и рис. 1-2 методического пособия.

ПЦР позволяет амплифицировать ДНК, иными словами получить огромное количество копий фрагментов ДНК, содержащихся в биоматериале порой в ничтожно малом количестве. При помощи ферментов, называемых полимеразами (в природе они принимают участие в синтезе молекул ДНК или РНК по соответствующей матрице во время репликации или транскрипции), удается копировать выбранный фрагмент ДНК – первоначально по матрице ДНК, присутствующей в образце (крови, биоптате, соскобах и т.д.), а в последующих циклах по матрице получаемых в предыдущих циклах фрагментов, так что количество фрагментов ДНК, необходимых для анализа, увеличивается в геометрической прогрессии.

Наиболее распространено применение ПЦР для диагностики инфекций. Например, применение ПЦР позволяет диагностировать ВИЧ-инфекцию быстрее, чем стандартный ELISA-тест (основанный на определении антител) – уже в первые недели после заражения. Кроме того, ПЦР применяется для определения генетических вариаций и мутаций, определяющих проявления различных моногенных и комплексных заболеваний. В биологии и биотехнологии применяют ПЦР для секвенирования ДНК и клонирования генов, а также для выявления эволюционного родства среди организмов. В криминалистике – для сравнения генетического материала с места преступления с генетическим материалом подозреваемого; для установления отцовства.

Контроль полученных знаний

В чем состоит суть метода ПЦР?
Какова сфера применения ПЦР в биологии и медицине?
Какие циклы включает ПЦР?
Что такое праймеры и для чего они необходимы?
Какие ДНК-полимеразы применяют в ПЦР?
Какой метод чаще всего применяют для визуализации результатов амплификации?

Изучит основные принципы получения и использования в медицине и биологии моноклональных антител. См. стр. 11-17 и рис. 3-4 методического пособия.

Антитела, специфичные к одному эпитопу и продуцируемые одним В-клеточным клоном называются моноклональными.

Для получения мышиных моноклональных антител, необходимо пройти 4 стадии: 1) иммунизацию, 2) гибридизацию иммунных В-клеток с клетками миеломы и селекцию, 3) скрининг, 4) исследование свойств полученных антител и их описание.

Моноклональные антитела могут применяться в различных целях. Как правило, цели эти – научно-исследовательские (например, эпитопное картирование антигена) или диагностические (диагностика инфекций, гистопатологическая диагностика аутоиммунных заболеваний, злокачественных опухолей и т.д.). Применение их в комбинации с такими методами, как эпитопное картирование и молекулярное моделирование, делает возможным составление антигенного профиля и визуализацию макромолекулярной поверхности.

Контроль полученных знаний

Что такое моноклональные антитела и для чего их используют?
Что такое антигенные эпитопы и какие они бывают?
Какие этапы включает в себя процесс получения мышиных моноклональных антител?
Опишите, как происходит процесс иммунизации мышей с целью получения моноклональных антител.
Опишите стадию гибридизации полученных В-клеток и селекции гибридом.
Что такое скрининг гибридом?
Как производится анализ полученных моноклональных антител? Что такое эпитопное картирование?
Какова суть метода поверхностного плазмонного резонанса?

Познакомится с принципом получения и использования в медицине и биологии химерных, гуманизированных и рекомбинантных антител. См. стр. 18-24 и рис. 5-6 методического пособия.

В биотехнологии налажено получение различных видов моноклональных химерных антител. Это химерные антитела первого поколения – гибридные антитела с мышиным Fab- и человеческим Fc-доменом. Это и гиперхимерные антитела второго поколения, в которых используются лишь минимальные фрагменты мышиного антитела, определяющие его комплементарность к антигену, эти фрагменты как бы встроены в структуру человеческого антитела. Наконец, это – биспецифические гуманизированные антитела. Биспецифичные антитела получают из моноклональных антител, специфичных к совершенно разным антигенам.

Чаще всего рекомбинантные антитела применяются в качестве лабораторных реагентов, заменяющих обычные антитела, например, в проточной цитометрии или иммуногистохимическом и иммуноферментном анализах. Также рекомбинантные антитела могут применяться в терапевтических целях, например для лечения злокачественных новообразований или аутоиммунных заболеваний.

Контроль полученных знаний

Для чего потребовалась «гуманизация» мышиных моноклональных антител?
Какие подходы к модификации мышиных моноклональных антител были предложены?
Что такое scFv-фрагмент антитела?
Опишите технологию получения рекомбинантных фаговых антител.
Для чего применяют фаговые антитела?

Познакомится с принципом получения и использования в медицине и биологии генных вакцин. См. стр. 24-44, рис. 7 и табл. 1 методического пособия.

Генные вакцины представляют собой новый подход к иммунизации и иммунотерапии, использующий не живые или инактивированные микроорганизмы, и даже не их антигенные фрагменты (субъединицы), а гены – один или несколько, - кодирующие белки патогена. В отличие от большинства традиционных вакцин, нацеленных на стимуляцию выработки антител, генные вакцины стимулируют и клеточные цитотоксические реакции, и ответ с участием антител. К генным вакцинам относятся вакцины, использующие вирусные векторы, и ДНК-вакцины. Основу ДНК-вакцины составляют плазмиды, в структуру которых посредством генной инженерии вставлены гены, кодирующие антигены микроорганизма. Суть технологии создания вирусных векторных вакцин можно описать следующим образом: в качестве вектора берут «проверенный» безопасный вирус (например, аденовирус) и вставляют в него гены, кодирующие антигенные белки других патогенных микроорганизмов.

Контроль полученных знаний

Какие вакцины относятся к вакцинам первого, второго и третьего поколения? Какие достоинства и недостатки присущи каждому поколению вакцин?
Дайте определение понятию «генная вакцина».
Что представляет собой ДНК-вакцина?
Какие компоненты включает векторная плазмида ДНК-вакцины?
Зависит ли выбор иммуногена для ДНК-вакцины от типа иммунного ответа, который желательно получить и если зависит, то как?
Каковы предполагаемые механизмы действия ДНК-вакцин? Что такое кросс-прайминг?
Что такое ДНК-вакцины второго поколения? Почему возникла необходимость в разработке таких вакцин? Какими модификациями можно повысить эффективность ДНК-вакцин?
Что представляют собой вирусные рекомбинантные вакцины? Какие преимущества они имеют перед другими типами вакцин?
Какие типы вирусов можно использовать в качестве векторов для вирусных генных вакцин?
Охарактеризуйте достоинства и недостатки поксивирусов как векторов для генных вакцин. Каков принцип конструкции вектора на основе вируса коровьей оспы?
Каковы достоинства и недостатки аденовирусных векторов? Какие виды аденовирусных векторов вы знаете? Как конструируются аденовирусные векторы? Какие факторы ограничивают потенциальное использование вакцин на основе аденовирусных векторов?
Опишите преимущества альфавирусных векторов. Каковы основные принципы создания вакцин на их основе?
Каковы достоинства и недостатки полиовирусных векторов? Какие виды полиовирусных векторов существуют и как их создают?
Дайте характеристику ВПГ-векторам. В чем заключается их основной недостаток?
Какие факторы необходимо учитывать при выборе вирусного вектора для генной вакцины?

Познакомится с принципом получения и использования в медицине и биологии растительных вакцин. См. стр. 45-50 и табл. 2 методического пособия.

Суть создания растительной вакцины заключается в том, что с помощью генной инженерии изменяют свойства растений или вирусов растений так, что они начнут производить рекомбинантные белки, которые можно будет использовать в качестве вакцины от самых разнообразных болезней. Антигены, содержащиеся в трансгенных растениях, имеют возможность попасть в кишечник, не разрушаясь по дороге, т.к. наружная стенка клеток растений защищает их от воздействия желудочного сока. В кишечнике освобожденные из растительных клеток антигены захватываются М-клетками, а затем попадают в пейеровы бляшки и в регионарные лимфоузлы, где они могут быть представлены АПК. В результате индуцируется иммунный ответ – как локальный, так и системный. Помимо собственно вакцин, трансгенные растения могут применяться в медицине и в иных целях. Они могут служить продуцентами моноклональных антител, цитокинов, интерферонов и других рекомбинантных белков, полезных при лечении инфекционных, онкологических и аутоиммунных болезней.

Контроль полученных знаний

Что представляют собой растительные вакцины и каков механизм их действия?
Каким способом можно ввести гетерологичную ДНК в геном растения?
Приведите примеры трансгенных растений, использующихся в медицине. Укажите их достоинства и недостатки.
В каких целях могут применяться трансгенные растения?

Познакомится с использованием в медицине рекомбинантных лекарственных препаратов. См. стр. 51-55 методического пособия.

Лекарственные препараты, применяемые в иммунологической лечебной практике и получаемые с помощью технологии рекомбинантной ДНК, можно разделить на три основные группы: 1) рекомбинантные вакцины – белковые (пептидные) или генные, 2) рекомбинатные антитела и слитые (химерные) белки, 3) рекомбинантные цитокины (интерфероны, интерлейкины, фактор некроза опухоли и др.) и антагонисты рецепторов цитокинов.

Контроль полученных знаний

Назовите основные группы рекомбинантных лекарственных препаратов, применяемых в иммунологической практике
Какие организмы могут служить продуцентами рекомбинантных белков?
Что такое слитые белки?
Каковы мишени рекомбинантных антител и слитых белков, применяющихся в терапевтической практике. Приведите примеры соответствующих препаратов.
Как получают и в каких целях применяют рекомбинантные интерфероны? В чем заключается технология пегелирования интерферонов?
Приведите примеры рекомбинантных интерлейкинов. В каких целях используются эти препараты?

Познакомится со способами получения и использованием в медицине стволовых клеток. См. стр. 56-79 и рис 8-16 методического пособия.

Эмбриональные стволовые клетки (ЭСК) получают из эмбрионов, образовавшихся в результате экстракорпорального оплодотворения и используют в исследовательских целях. После того, как удается получить стабильную линию ЭСК эти клетки заставляют дифференцироваться в нужном направлении. Для этого существует несколько подходов, которые применяют изолированно или в комбинациях:

добавление в культуральную среду определенных ростовых факторов
совместное культивирование и трансплантация ЭСК с другими клетками, индуцирующими дифференцировку (часто это клетки мезенхимального происхождения)
имплантация ЭСК в органы животных
стимуляция экспрессии генов, действующих на ранних стадиях эмбриогенеза

Были проведены успешные попытки получения из человеческих ЭСК популяции функциональных Т-клеток. Более того, перед дифференцировкой, ЭСК были трансфецированы вирусным вектором, содержащим репортерный ген. Получившиеся от таких модифицированных клеток тимоциты продолжали экспрессировать данный ген. Это означает, что из человеческих ЭСК можно не только получать тимоциты, но и задавать им нужные свойства (например, устойчивость к ВИЧ) путем генноинженерных модификаций.

Кроме того, в медицине при различных формах лейкозов, врожденных болезнях крови и аутоиммунных болезнях стали использоваться методы трансплантации кроветворных стволовых клеток (ТКСК). В медицине для лечения аутоиммунной патологии уже неоднократно предпринимались попытки элиминации лимфоцитов, индуцирующих или поддерживающих аутоиммунный процесс. В качестве терапевтической процедуры производится элиминация обоих типов лимфоцитов посредством полной иммуноабляции циклофосфамидом в комбинации с антитимоцитарным и антилимфоцитарным глобулинами с последующим проведением ТКСК. Такой подход способен привести к излечению или стойкой ремиссии тяжелой аутоиммунной патологии.

Для пересадки используются также мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки которые, следуя по традиции называют мезенхимальными стволовыми клетками (МСК). Наиболее интересным с точки зрения практической медицины свойством МСК является их выраженная иммуномодулирующая активность. Гаплоидентичные МСК были с успехом применены для замедления реакции «трансплантат против хозяина». Было также продемонстрировано иммуносупрессивное действие МСК на модели экспериментального аллергического энцефаломиелита.

1 2 3 4 5 6 7

	Правила приема в Государственное бюджетное образовательное учреждение... «Московский государственный медико-стоматологический университет имени А. И. Евдокимова»		Программа по практике Помощник врача стоматолога (терапевта) «московский государственный медико-стоматологический университет имени а. И. Евдокимова»
	Рабочая программа по дисциплине (модулю) анестезиология реаниматология «московский государственный медико-стоматологический университет имени а. И. Евдокимова»		Российской Федерации Государственное бюджетное образовательное учреждение... «московский государственный медико-стоматологический университет имени а. И. Евдокимова»
	Российской Федерации Государственное бюджетное образовательное учреждение... «московский государственный медико-стоматологический университет имени а. И. Евдокимова»		Российской Федерации Государственное бюджетное образовательное учреждение... «московский государственный медико-стоматологический университет имени а. И. Евдокимова»
	Российской Федерации Государственное бюджетное образовательное учреждение... «московский государственный медико-стоматологический университет имени а. И. Евдокимова»		Российской Федерации Государственное бюджетное образовательное учреждение... «московский государственный медико-стоматологический университет имени а. И. Евдокимова»
	Правила приема Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Московский государственный медико-стоматологический...		Правила приема Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский государственный медико-стоматологический...

Московский государственный медико-стоматологический университет

Похожие: